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磷酸蛋白體學研究:(1)光合菌Rhodopseudomonas palustris的不同代謝調控(2)細胞表面ATP合成酶的反應路徑

為了解決Ntuh mail的問題，作者胡家瑋 這樣論述：

蛋白職磷酸化存在於原核及真核生物中，是一種重要的轉譯後修飾。為了解細胞生理的調控，系統性研究細胞內的磷酸化蛋白已成為必要的項目。在本研究中，磷酸蛋白體分析被分別應用於真核和原核系統，藉此去探討細胞內分子的調控，並利用「羥基酸修正金屬氧化物層析」(hydroxy acid-modified metal oxide chromatography, HAMMOC) 去有效的純化磷酸化胜肽。在原核生物磷酸化蛋白體學研究裡，我們探討Rhodopseudomonas palustris (R. palustris)不同的代謝調控。R. palustris 是一種紫色非硫化厭氧光合菌，具有代謝多樣性並可生

長於光合與化學異營條件。此細菌也具有製造生質能源與生物分解的潛力。本研究為第一個揭開R. palustris在磷酸化蛋白體資訊，包含化學異營的100條磷酸化胜肽(54個磷酸化蛋白)及光合異營的74條磷酸化胜肽(42個磷酸化蛋白)。其中, 丙酮酸磷酸雙激酶(pyruvate phosphate dikinase, PPDK)在第487個蘇氨酸的磷酸化被發現可能參與在不同生長條件的碳代謝調控。我們在此研究中發現PPDK在PH生長中帶有較多第487個蘇氨酸磷酸化與較高的活性。在PH的條件下，我們進一步發現，過度表現的正常PPDK能比突變無法磷酸化的PPDK(T487V)更能促進脂質的製造。本研究展現

了PPDK在生質柴油─脂質製造的重要性，並揭露第487個蘇氨酸磷酸化在脂質生成及PH生長的調控角色。在真核生物的磷酸化蛋白體研究中，ATP合成酶抑制劑在肺癌細胞中的反應途徑是探討的主題。ATP合成酶是一個由多種蛋白質組成的化合物並促進ATP的生成。長期以來ATP合成酶被認定只存於粒線體，但近年研究發現，ATP合成酶也會出現在特定細胞的細胞表面上(包含癌細胞)，此種合成酶被稱作異位型ATP合成酶(ecto-ATP synthase)。ATP合成酶抑制劑被認為具有成為癌症藥物的潛力，其打擊癌症的作用主要是透過有效的抑制異位型ATP合成酶，但並不會對粒線體的功能造成明顯影響。在本研究中我們利用定量磷

化蛋白體學方式，分析在癌細胞及異種移植組織中ATP合成酶抑制劑所引起的分子反應。利用此方法，共2834條磷酸化胜肽(836的磷酸化蛋白)與862條磷酸化胜肽(423個磷酸化蛋白)分別被發現於癌細胞與異種移植組織。基因本體分析顯示ATP合成酶抑制劑會影響蛋白質折疊、細胞週期及細胞骨架的磷酸化調控。透過集群與網路分析時間依賴的磷酸化蛋白體資訊，我們進一步發現ATP合成酶抑制劑能立即的抑制熱休克蛋白(heat shock protein 90, HSP90AB1)在第255個絲胺酸的磷酸化，並於抑制劑處理的晚期造成有絲分裂活化蛋白質激酶(mitogen-activated protein kinas

e 1, MAPK1)在活化功能區(TEY domain)的去磷酸化。MAPK1參與在MAPKs/ERKs的訊息傳遞中，而此訊息傳遞已知與癌症的發展有關。我們利用HSP90在第255氨基酸的突變(HSP90-S255A)去闡明HSP90的磷酸化對MAPKs/ERKs訊息傳遞的影響，並發現HSP90-S255A的突變無法調控MAPK1的磷酸化及MAPKs/ERKs的訊息傳遞。這些研究結果顯示，利用ATP合成酶抑制劑阻斷癌細胞的異位型ATP合成酶，能透過調控HSP90磷酸化所控制的MAPKs/ERKs訊息傳遞，來達到抑制癌細胞生長的目的。本研究不僅提供了發展標靶治療的新方向，也拓展了對抑制肺腫瘤發

長之反應途徑的了解。

探討遠距照護服務之關鍵因子

為了解決Ntuh mail的問題，作者廖怡閔 這樣論述：

根據以往的研究，遠距照護或醫療必須以客戶為中心，才能在當今競爭激烈的市場中生存。雖然先前的研究已經討論了資訊科技於遠距照護的使用，很少有研究著重於客戶的角度來看，一個良好的遠距照護的客戶的要求是什麼，現在還尚未清楚。因此，本研究試圖確定影響客戶的意圖，採納和使用遠距照護的服務功能。本研究使用服務功能分類，分為五類：通過誰，什麼，誰，何時，以及如何做為研究面向。本研究欲發現哪些服務功能，可以觸發的潛在客戶的興趣，增強他們願意接納服務，並激勵現有客戶繼續使用該服務。這項研究的結果已經顯示，影響人的意圖，採取服務的因素是：在服務加入的管道，服務的組件，疾病類型和年齡，服務供應的頻率，和服務和平台的

滿意度。此外，影響人們採用的服務因子包括：服務加入的管道，服務的組件，疾病類型和年齡，服務供給的頻率，和服務和平台的滿意度。此外，結果顯示影響人們繼續使用該服務的服務得因子有，疾病類型和年齡的組成部分和服務和平台的滿意度。